כיצד להפעיל מחדש את העמודה C18

Reenerate C18 שלך בשלב הפוכה עמוד HPLC.

שלב 1

נתק את העמודה C18 מזרם הזרימה והחלף את העמודה בכיוון ההפוך. הפעלת הממס חזרה דרך העמודה בכיוון ההפוך תשחרר את אפקט האריזה המתרחשת לאורך זמן. יש להקפיד לא לאבד כמות גדולה של חומר אריזה בסוף הטור. יצרנים מסוימים משתמשים ברשת גדולה יותר במעלה הזרם של העמודה, כך שכאשר כיוון הזרימה מתהפך, הרשת הגדולה יותר נמצאת במורד הזרם. שיטה זו של התחדשות נקרא backwashing. כדי להגן מפני חומר האריזה הזורם לתוך גלאי המערכת ואולי גרימת תקע, הוא מאפשר למערכת לפעול ללא גלאי מחובר ולכוון את זרימת הפלט של העמוד אל הפסולת.

שלב 2

מניחים את צינור מפרצון ממס בסדרה של ממיסים כדי elute תרכובות שמר עם הטור בכיוון ההפוך. סדרה של ממיסים המשמשים להשתנות המאפיינים הידרופילי שלהם. על ידי שינוי הממיסים תוכל elute תרכובות בעלות אופי הידרופיליות מגוונות באותה מידה. השתמש 50 מ"ל של כל אחד ממיסים הבאים בתורו: מים (אם אתה משתמש חיץ הממס שלך), מתנול, isopropanol, dichloromethane, הקסאן, dichloromethane ו isopropanol.

שלב 3

חבר מחדש את העמודה בכיוון הנכון והפעל את הממס דרך המערכת. השתמש לפחות 75 מ"ל של ממס כדי לשטוף את הטור לפני שתמשיך. בצע בדיקת זריקה של תקן שביצעת כאשר העמודה הייתה חדשה ובדוק את התוצאות. הקדש תשומת לב מיוחדת לשעות של שימור מקסימלי, תורי שיא וזמן הניתוח הכולל. המידה שבה מאפיינים אלה עולים בקנה אחד עם הביצוע הראשוני של העמוד כאשר הוא חדש, יציין את המידה שבה התחדש הטור. אם התוצאות אינן משביעות רצון, להחליף את העמודה עם אחד חדש לזרוק את העמודה הישנה באשפה.